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FastPfu DNA polymerase 酶

FastPfu DNA polymerase 酶

简要描述:FastPfu DNA polymerase 酶:高保真DNA聚合酶,扩增速度2-4kb/min

浏览量: 177

所属分类:酶

更新日期:2020-07-28

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌规格100/500/100U
供货周期现货主要用途PCR扩增
应用领域生物产业

FastPfu DNA polymerase 酶

产品应置于-20 保存。

产品质控

1)性能检测 1

50 μL PCR 反应体系加入 1 U FastPfu DNA Polymerase100 ng Human RP11 13M9-pBACe3.6 质粒,

扩增 15 kb DNA 目的片段,在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 15 kb 处检测到较亮的单一目

的条带。

2)性能检测 2

50 μL PCR 反应体系加入 1 U FastPfu DNA Polymerase、大肠杆菌菌落,扩增 5 kb DNA 目的片

段,在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 5 kb 处检测到较亮的单一目的条带。

3)大肠杆菌核酸残留检测:

20 μL 荧光定量 PCR 反应体系加入 1 U FastPfu DNA Polymerase 和大肠杆菌特异基因扩增引物(如

gapA);在不加入大肠杆菌 DNA 模板的情况下,20 个循环内荧光信号值在基线范围。

 

 FastPfu DNA polymerase 酶

常规 PCR 反应体系: 

1. 在冰浴上设置 PCR 反应(供参考)*

模板:                     < 500 ng

2× FastPfu Buffer:   25 μL

Primer 1/2:               0.2 - 1.0 μM

dNTPs (10 mM):     1 μL

FastPfu:                  1 μL

灭菌蒸馏水 Up to 50 μL

 

2. PCR 反应参数(供参考)**

(起始变性): 95 ℃ 5 min

(解链): 98 5 sec

(退火): 55 ℃ 30 sec

(延伸): 72 ℃ x min 30-35 循环:2 kb/min

(终延伸): 72 ℃ 7 min

 

* 针对不同类型的模板,所需的模板量会有不同,如基因组和质粒,等等;需要根据实际情况,添加合适的模

板量;** 退火温度需根据引物和模板实际的 G+C 含量来作调整



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