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dCas9 CRISPR 酶

dCas9 CRISPR 酶

简要描述:dCas9 CRISPR 酶是将 PCR 反应用到的超保真 P6 DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 以及稳定剂以 2倍的终浓度进行混合。

浏览量: 52

所属分类:酶

更新日期:2020-10-09

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

dCas9 CRISPR 酶

产品简介

ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆转录酶 ToloScript Reverse TranscriptaseRTase)和针对逆转录优化的

适缓冲液,进一步提高了 cDNA 合成的效率,适用于两步法 qRT-PCR 检测。试剂盒中的 5 × ToloScript qRT

EasyMix 含有逆转录反应所需的所有组分,加入模板 RNA 和水即可迅速进行反应。逆转录产物兼容染料法与探针

qPCR,可进行基因表达的高效分析。

dCas9 CRISPR 酶

适用范围

高拷贝、低拷贝靶标基因转录水平的检测,与 qPCR 联用。

产品组成

组分

22105-01

RNase-free ddH2O

2 × 1 mL

5 × ToloScript qRT EasyMixa

400 μL

5 × No RT Control Mixb

dCas9 CRISPR 酶

保存条件

-20 ℃储存。

质量控制

纯度检测:所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶及 RNase 残留。

功能检测:以 1 µg HeLa 细胞总 RNA 为模板进行逆转录反应,通过 qPCR 检测 4 个基因的表达量,Ct 值在批次间产

品中基本相同。在 1 µg HeLa 细胞总 RNA 中混入 100 ng gDNA,经 2-Step gDNA Erase-Out Mix 处理后加入 No

RT Control Mix,然后进行 qRT-PCR,获得的 Ct >40

实验流程

1. 配制逆转录反应体系

RNase-free 的离心管中配置如下体系,用移液器轻轻吹打混匀。

5 × ToloScript qRT EasyMix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

RT EasyMix for qPCR  

No RT Control 反应(可选)

No RT Control 是指不加逆转录酶的阴性对照反应,用于检验 RNA 模板中是否有 gDNA 残留。

RNase-free 离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。

5 × No RT Control Mix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

2. 进行逆转录反应

37 ℃*

15 min

85 ℃

5 sec

产物可立即用于 qPCR 反应,或冻存于-20℃,并在半年内使用;如需长期存放,则建议将反转录 cDNA 产物分装后

冻存于-80 ℃cDNA 应避免反复冻融。

注意事项

1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 5 × No RT Control Mix 中均含有高浓度的甘油,所以在使用前请短

暂离心,并轻弹(或用移液枪轻轻吸打混匀)后,准确吸取。

2. 20 µL 逆转录反应体系中建议加入不超过 1 µg Total RNA。若目的基因的表达量非常低,则可以

多加入 5 µg Total RNA;否则,如果加入 RNA 量过高,可能会超出后续 qPCR 的线性范围。

3. 本试剂盒制备的 cDNA 产物仅适用于 qPCR 反应,不适用于进行长片段目的基因的 PCR 扩增。

产品简介

ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆转录酶 ToloScript Reverse TranscriptaseRTase)和针对逆转录优化的

适缓冲液,进一步提高了 cDNA 合成的效率,适用于两步法 qRT-PCR 检测。试剂盒中的 5 × ToloScript qRT

EasyMix 含有逆转录反应所需的所有组分,加入模板 RNA 和水即可迅速进行反应。逆转录产物兼容染料法与探针

qPCR,可进行基因表达的高效分析。

适用范围

高拷贝、低拷贝靶标基因转录水平的检测,与 qPCR 联用。

产品组成

组分

22105-01

RNase-free ddH2O

2 × 1 mL

5 × ToloScript qRT EasyMixa

400 μL

5 × No RT Control Mixb

保存条件

-20 ℃储存。

质量控制

纯度检测:所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶及 RNase 残留。

功能检测:以 1 µg HeLa 细胞总 RNA 为模板进行逆转录反应,通过 qPCR 检测 4 个基因的表达量,Ct 值在批次间产

品中基本相同。在 1 µg HeLa 细胞总 RNA 中混入 100 ng gDNA,经 2-Step gDNA Erase-Out Mix 处理后加入 No

RT Control Mix,然后进行 qRT-PCR,获得的 Ct >40

实验流程

1. 配制逆转录反应体系

RNase-free 的离心管中配置如下体系,用移液器轻轻吹打混匀。

5 × ToloScript qRT EasyMix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

RT EasyMix for qPCR  

No RT Control 反应(可选)

No RT Control 是指不加逆转录酶的阴性对照反应,用于检验 RNA 模板中是否有 gDNA 残留。

RNase-free 离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。

5 × No RT Control Mix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

2. 进行逆转录反应

37 ℃*

15 min

85 ℃

5 sec

产物可立即用于 qPCR 反应,或冻存于-20℃,并在半年内使用;如需长期存放,则建议将反转录 cDNA 产物分装后

冻存于-80 ℃cDNA 应避免反复冻融。

注意事项

1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 5 × No RT Control Mix 中均含有高浓度的甘油,所以在使用前请短

暂离心,并轻弹(或用移液枪轻轻吸打混匀)后,准确吸取。

2. 20 µL 逆转录反应体系中建议加入不超过 1 µg Total RNA。若目的基因的表达量非常低,则可以

多加入 5 µg Total RNA;否则,如果加入 RNA 量过高,可能会超出后续 qPCR 的线性范围。

3. 本试剂盒制备的 cDNA 产物仅适用于 qPCR 反应,不适用于进行长片段目的基因的 PCR 扩增。



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