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DH10B plus 化转克隆感受态

DH10B plus 化转克隆感受态

简要描述:DH10B plus 化转克隆感受态
产品简介本品为使用大肠杆菌 DH10B 菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率可达 108 cfu/μg DNA,被广泛用于质粒转化、基因克隆等;可以使用蓝白斑筛选。产品简介本品为使用大肠杆菌 DH10B 菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率可达 108 cfu/μg DNA,被广泛用于质粒转化、基因克隆等;可以使用蓝白斑筛选。

浏览量: 93

所属分类:酶

更新日期:2020-10-10

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

DH10B plus 化转克隆感受态

产品简介

本品为使用大肠杆菌 DH10B 菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率可达 108 cfu/μg DNA,被广

泛用于质粒转化、基因克隆等;可以使用蓝白斑筛选。

产品组成

组分

CC96101-01

CC96101-02

CC96101-03

DH10B 感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697

galE15 galK λ- rpsL nupG

DH10B plus 化转克隆感受态

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

-来源于 MC1061 菌株,可用于基因克隆等;

-rpsL 突变赋予 DH10B 菌株链霉素抗性;

-蓝白斑筛选时,需在平板上预先涂布 IPTG X-gal

-mcrAmcrBC mrr 突变使 DH10B 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA

-由于 recA1 endA1 的突变,因此该菌株的重组率较低,有利于插入 DNA 的稳定,故常用于克隆

质粒的保存和高纯度质粒 DNA 的提取。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min

4. 向离心管中加入900 μL LBSOC培养基(室温或37 ℃预热)然后置于37 ℃摇床复壮45 min

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

DH10B plus 化转克隆感受态

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

产品简介

本品为使用大肠杆菌 DH10B 菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率可达 108 cfu/μg DNA,被广

泛用于质粒转化、基因克隆等;可以使用蓝白斑筛选。

产品组成

组分

CC96101-01

CC96101-02

CC96101-03

DH10B 感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697

galE15 galK λ- rpsL nupG

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

-来源于 MC1061 菌株,可用于基因克隆等;

-rpsL 突变赋予 DH10B 菌株链霉素抗性;

-蓝白斑筛选时,需在平板上预先涂布 IPTG X-gal

-mcrAmcrBC mrr 突变使 DH10B 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA

-由于 recA1 endA1 的突变,因此该菌株的重组率较低,有利于插入 DNA 的稳定,故常用于克隆

质粒的保存和高纯度质粒 DNA 的提取。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min

4. 向离心管中加入900 μL LBSOC培养基(室温或37 ℃预热)然后置于37 ℃摇床复壮45 min

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。



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