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DH10Bac  化转克隆感受态

DH10Bac 化转克隆感受态

简要描述:DH10Bac 化转克隆感受态产品简介
DH10Bac 菌株主要用于生产重组杆状病毒分子(Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统)。该菌株中含有父
本 bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 复制子, 卡那抗
性基因, attTn7 位点和 lacZα 互补因子

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所属分类:酶

更新日期:2020-10-10

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

产品简介

DH10Bac  化转克隆感受态

DH10Bac 菌株主要用于生产重组杆状病毒分子(Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统)。该菌株中含有父

bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 复制子, 卡那抗

性基因, attTn7 位点和 lacZα 互补因子;而辅助质粒 pMON7124 含有 tnsABCD 区,可表达转座蛋白

来帮助把供体质粒上的 mini-Tn7 插入到父本的 bacmid 上的靶标位点。当 DH10Bac 感受态细胞转化

了在多克隆位点克隆了外源片段的供体质粒(pFastBac)时,该菌株可生成复合 bacmidDH10Bac

菌株携带 ϕ80lacZΔM15 突变,因此可用于蓝白斑筛选实验。经 pUC18 质粒转化检测,DH10Bac

受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA

DH10Bac  化转克隆感受态

产品组成

组分 CC96136-01 CC96136-02 CC96136-03

DH10Bac

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL

nupG /pMON14272 / pMON7124

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

DH10Bac  化转克隆感受态

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 将待转化DNA加入到100 μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30 min

3. 将离心管置于42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激90s后,立刻置于冰浴中静置2-3 min

4. 向离心管中加入900 μL LBSOC培养基(室温或37 ℃预热),后置于37 ℃摇床复壮45 min

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10

3. 加入待转化DNA后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。



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