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JM110 化转克隆感受态

JM110 化转克隆感受态

简要描述:JM110 化转克隆感受态态菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的杂合产物(同时也是 Stbl3 的原始菌株)。该菌株
携带 recA13 突变,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但由于其不含核
酸酶 endA1 突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液以去除
核酸酶。

浏览量: 42

所属分类:酶

更新日期:2020-10-12

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

产品简介

JM110化转克隆感受态

HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的杂合产物(同时也是 Stbl3 的原始菌株)。该菌株

携带 recA13 突变,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但由于其不含核

酸酶 endA1 突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液以去除

核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失内切酶系统,增强了外源 DNA 的稳定性和提取质量;此菌株具

有链霉素抗性;不存在 lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。经 pUC18 质粒转化检测,HB101

受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA

产品组成

JM110化转克隆感受态

组分 CC96174-01 CC96174-02 CC96174-03

HB101

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- mcrB mrr hsdS20 (rB- mB- ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR) glnV44 λ-

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

JM110化转克隆感受态

质量控制

无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min

4. 向离心管中加入 900 μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。



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