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*0F化转克隆感受态

*0F化转克隆感受态

简要描述:*0F化转克隆感受态 *0/P3 大肠杆菌菌株含有 60-kb 低拷贝数的 P3 质粒,该质粒携带卡那霉素、四环素和氨苄抗性基因。四环素和氨苄抗性基因携带琥珀突变,这使得这些基因在细菌的正常生长和复制过程中不活动。在转化携带抑制因子基因(例如 pcDNA1.1 或 pCDM8)的质粒后,四环素和氨苄抗性基因中的
琥珀突变被抑制,从而使宿主大肠杆菌对这些抗生素具有抗性。

浏览量: 167

所属分类:酶

更新日期:2020-10-12

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

*0F化转克隆感受态

产品简介

*0/P3 大肠杆菌菌株含有 60-kb 低拷贝数的 P3 质粒,该质粒携带卡那霉素、四环素和氨苄抗性

基因。四环素和氨苄抗性基因携带琥珀突变,这使得这些基因在细菌的正常生长和复制过程中不

活动。在转化携带抑制因子基因(例如 pcDNA1.1 pCDM8)的质粒后,四环素和氨苄抗性基因中的

琥珀突变被抑制,从而使宿主大肠杆菌对这些抗生素具有抗性。经 pUC18 质粒转化检测,

*0/P3 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。

产品组成

组分 CC96130-01 CC96130-02 CC96130-03

*0/P3

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1

nupG

*0F化转克隆感受态

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min

4. 向离心管中加入 900 μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

*0F化转克隆感受态

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

产品简介

*0/P3 大肠杆菌菌株含有 60-kb 低拷贝数的 P3 质粒,该质粒携带卡那霉素、四环素和氨苄抗性

基因。四环素和氨苄抗性基因携带琥珀突变,这使得这些基因在细菌的正常生长和复制过程中不

活动。在转化携带抑制因子基因(例如 pcDNA1.1 pCDM8)的质粒后,四环素和氨苄抗性基因中的

琥珀突变被抑制,从而使宿主大肠杆菌对这些抗生素具有抗性。经 pUC18 质粒转化检测,

*0/P3 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。

产品组成

组分 CC96130-01 CC96130-02 CC96130-03

*0/P3

化学感受态细胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1

nupG

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留;

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min

4. 向离心管中加入 900 μL LB SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保.高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。



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