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DH5α λpir感受态 技术新闻

DH5α λpir感受态 技术新闻

简要描述:DH5α λpir感受态 公司新闻

浏览量: 39

所属分类:感受态

更新日期:2021-03-24

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

DH5α λpir:                                              100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存条件(保质期):                            -80℃(6个月) 

 

基因型

F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) LAMpir U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA

 

 

 

 

产品说明

DH5α λpir菌株来源于DH5α,在DH5α大肠杆菌基因组中引入LAMpir,即为DH5α λpir,该菌株可以表达 PIR蛋白,使得含有R6Kg ori复制子的质粒可以在其中正常复制。 DH5α λpir菌株缺失核酸内切酶 (endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型 (recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA 的稳定性;lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛选;但DH5α λpir菌株生长速度较慢,在平板培养或液体摇菌时应延长生长时间。唯地生物开发的DH5α λpir感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>1×10cfu/μg DNA。

 

 

 

 

操作方法

1. DH5α λpir感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手打EP管底混匀,冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (LB),混匀后37℃,200 rpm复苏70分钟。

4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱至少18小时。



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