产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > 细胞 > 感受态 > C58C1 Electro感受态
产品分类

Product category

相关文章

Related articles

C58C1 Electro感受态

C58C1 Electro感受态

简要描述:C58C1 Electro感受态

浏览量: 89

所属分类:感受态

更新日期:2021-03-25

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业

C58C1 Electro:                                                           50μl/支
pCAMBIA2301(control vector,10ng/μl ):                 10μl
保存条件(保质期):                                          -80℃(12个月)

 

基因型

Agrobacterium rhizogenes (strR,lifR ) pRiA4b (agropine type)

 

产品说明

 

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。C58C1发根农杆菌菌株含有pRiA4b农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(蔷薇科,夹竹桃科,豆科,茄科,黄芩,烟草等),同时具有链霉素,利福平抗性。唯地生物开发的C58C1电转感受态特别适用于大质粒的转化,感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测,转化效率>>10cfu/μg DNA;经pCAMBIA2301-ZH质粒(size:40 kb)检测转化效率可达5×10cfu/μg DNA。

 

 

常规操作方法

1. 0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。

2. 取-80℃保存的农杆菌感受态插入冰中5分钟,待其融化,加入0.01-1 μg质粒DNA(体积不大于6ul,好用试剂盒抽提,双蒸水溶解;转化效率较高,一次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,立即插入冰中,用200 μl枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用。

3. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数为Biorad 推荐,使用者也可按所用电转仪推荐的protocol操作),将电击杯从冰中拿出,吸水纸吸干外表面水份,快速放入电转槽中,启动电击,电击完成快速插入冰中,加入1 ml无抗生素的TY,并转移到感受态空管中,28℃振荡培养2~3小时。

4. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的TY平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天



留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

contact us

咨询电话

17321241593

扫一扫,关注我们

返回顶部